近日,中國農業科學院農業質量標準檢測技術研究所畜產品質量安全創新團隊圍繞高值乳品鑒別開發了一系列快速、定量和多重檢測方法,為高值乳品市場監管提供了技術支撐。
相關研究成果發表在《食品化學(Food Chemistry)》等期刊上。該項研究得到“十三五”國家重點研發計劃等項目資助。
據介紹,近年來,隨著我國乳制品行業的快速發展,市場上出現了許多高值乳品,如山羊奶、牦牛奶、駱駝奶、馬奶、A2牛奶等。這些高值乳品有著更豐富的營養元素、獨特的風味以及保健作用等。因此,開發高值乳品鑒別方法對于保護消費者權益、保障人民生命健康十分必要。
針對不同物種乳品的現場快速鑒別需求,針對線粒體種屬特異性基因設計擴增引物,創新團隊開發了牦牛奶等重組酶聚合酶-核酸試紙條快速檢測技術,該方法無需PCR等復雜儀器,只需要簡單水浴或體溫加熱即可完成,配合團隊開發的乳品DNA快速提取方法,可以在40分鐘內完成牦牛奶的鑒定。同時為了符合農業領域檢測低成本的要求,團隊設計了基于C3終止加尾引物,避免了現有核酸試紙條技術中昂貴抗原抗體的使用,同時還提高了檢測效率。
為了解決液態奶樣品摻假定量檢測的問題,團隊開發了基于單拷貝核基因作為標志物,利用特異性基因與參考基因熒光定量PCR檢測的Ct值之比,推斷液態奶樣品中待檢牛奶占總牛奶的含量,分別建立了驢奶、駱駝奶的含量測定方法。該方法無需預先知道摻假乳品種類,一次分析即可確定高值奶的純度,避免傳統PCR方法因為沾染可能造成誤判的現象,也為根據摻假程度進行合理執法提供了技術依據。
圍繞高值奶多重鑒別,團隊還開發了基于實時熒光LAMP技術的微流控芯片產品。通過提前將各物種奶環介導等溫擴增引物固定到芯片上,檢測時只需要把提取DNA加到芯片上,通過上機檢測,可在90分鐘完成多個樣品多個指標的同時檢測。
此外,圍繞乳企A2奶牛選育和市場A2乳品鑒別的需求,團隊針對CSN基因突變位點,設計一對可以分別特異擴增A2和A1基因的PCR引物,同時設計了牛內參引物作為方法質控對照,利用ARMS-PCR技術,成功開發了A2奶牛鑒定和A2牛奶鑒別的熒光定量PCR試劑盒。
(單位:中國農業科學院農業質量標準檢測技術研究所 )
相關研究成果發表在《食品化學(Food Chemistry)》等期刊上。該項研究得到“十三五”國家重點研發計劃等項目資助。
據介紹,近年來,隨著我國乳制品行業的快速發展,市場上出現了許多高值乳品,如山羊奶、牦牛奶、駱駝奶、馬奶、A2牛奶等。這些高值乳品有著更豐富的營養元素、獨特的風味以及保健作用等。因此,開發高值乳品鑒別方法對于保護消費者權益、保障人民生命健康十分必要。
針對不同物種乳品的現場快速鑒別需求,針對線粒體種屬特異性基因設計擴增引物,創新團隊開發了牦牛奶等重組酶聚合酶-核酸試紙條快速檢測技術,該方法無需PCR等復雜儀器,只需要簡單水浴或體溫加熱即可完成,配合團隊開發的乳品DNA快速提取方法,可以在40分鐘內完成牦牛奶的鑒定。同時為了符合農業領域檢測低成本的要求,團隊設計了基于C3終止加尾引物,避免了現有核酸試紙條技術中昂貴抗原抗體的使用,同時還提高了檢測效率。
為了解決液態奶樣品摻假定量檢測的問題,團隊開發了基于單拷貝核基因作為標志物,利用特異性基因與參考基因熒光定量PCR檢測的Ct值之比,推斷液態奶樣品中待檢牛奶占總牛奶的含量,分別建立了驢奶、駱駝奶的含量測定方法。該方法無需預先知道摻假乳品種類,一次分析即可確定高值奶的純度,避免傳統PCR方法因為沾染可能造成誤判的現象,也為根據摻假程度進行合理執法提供了技術依據。
圍繞高值奶多重鑒別,團隊還開發了基于實時熒光LAMP技術的微流控芯片產品。通過提前將各物種奶環介導等溫擴增引物固定到芯片上,檢測時只需要把提取DNA加到芯片上,通過上機檢測,可在90分鐘完成多個樣品多個指標的同時檢測。
此外,圍繞乳企A2奶牛選育和市場A2乳品鑒別的需求,團隊針對CSN基因突變位點,設計一對可以分別特異擴增A2和A1基因的PCR引物,同時設計了牛內參引物作為方法質控對照,利用ARMS-PCR技術,成功開發了A2奶牛鑒定和A2牛奶鑒別的熒光定量PCR試劑盒。
(單位:中國農業科學院農業質量標準檢測技術研究所 )
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